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腦定位注射動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)流程如下
發(fā)布時(shí)間： 2025-09-11 點(diǎn)擊次數(shù)： 758次腦定位注射動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是一種利用腦立體定位技術(shù)，將藥物、病毒載體或其他物質(zhì)精確注入動(dòng)物大腦特定區(qū)域的研究方法，廣泛應(yīng)用于神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)及臨床前研究。其技術(shù)通過顱骨外的解剖標(biāo)志（如前囟、后囟、外耳道等）建立三維坐標(biāo)系（X/Y/Z軸），結(jié)合腦圖譜數(shù)據(jù)，確定目標(biāo)腦區(qū)的精確位置。實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物頭部被固定于立體定位儀，通過微電極、注射針等工具在非直視條件下完成定向注射，誤差通常控制在±0.1mm以內(nèi)。1、動(dòng)物準(zhǔn)備麻醉：常用7%s合氯醛（5ml/kg）或1%戊b比妥鈉（0.2ml）腹腔注射，確保動(dòng)物深度麻醉。固定：將動(dòng)物門齒卡入定位儀橫桿，耳桿插入外耳道，調(diào)整至鼻對(duì)正中、提尾不掉、顱骨水平。備皮：剃除頭頂部毛發(fā)，暴露手術(shù)區(qū)域。2、開顱與定位切口：沿矢狀縫切開皮膚約3cm，剝離骨膜，暴露前囟（Bregma）和后囟（Lambda）。調(diào)平：以Bregma為原點(diǎn)（零點(diǎn)），通過左右移動(dòng)相同距離（如3mm）并下針測(cè)Z軸坐標(biāo)，調(diào)整耳桿使左右高度差≤0.03mm，確保顱骨水平。鉆孔：根據(jù)腦圖譜確定目標(biāo)坐標(biāo)（如大鼠側(cè)腦室：AP=-0.8mm，ML=±1.5mm，DV=-4.0mm），用牙科鉆在顱骨上鉆孔，避免損傷硬腦膜。3、注射操作裝針：固定微量注射器，調(diào)節(jié)Z軸使針尖輕觸鉆孔處顱骨表面，歸零后緩慢下降至目標(biāo)深度。注射：以0.2-2μl/min的速度注射藥物（如病毒載體、化學(xué)物質(zhì)），體積通常為1-5μl。留針：注射完成后靜置5-10分鐘，確保藥液充分吸收，再緩慢退出針頭。4、術(shù)后處理縫合：用骨蠟封閉鉆孔，縫合皮膚并消毒。復(fù)蘇：將動(dòng)物置于加熱墊上保暖，待其蘇醒后歸籠觀察。
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