穩定細胞株篩選
穩定細胞株篩選實驗原理外源基因在細胞中的表達可分為兩大類,一類是瞬時表達,一類是穩定表達(又叫長久表達)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達到高水平的表達,但通常只持續幾天。后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因。建立穩定細胞株,一般是根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的**對靶細胞進行篩選。常用的抗性標記基因有潮霉素(hygromycin)、新m素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。
實驗流程1、載體構建(表達質粒載體、病毒載體);2、轉染/感染;3、目的蛋白初步檢測;4、***篩選;5、目的蛋白再次檢測(定性/半定量);6、單克隆細胞株穩定性檢測。四、 客戶提供培養好的細胞五、 公司提供:基本實驗步驟、圖片、數據分析結果和穩定表達細胞株實驗周期:大約3-4月左右,具體需要根據細胞實驗內容而定。
相關文章





