MTT實驗技術服務是細胞項目組成之一,該項目實驗由經驗豐富的人員進行操作。
MTT實驗技術服務本公司實驗過程所用試劑,全部為進口試劑,已實驗的準備性。 如果有特殊樣本,請提前說明,價格另議。
一、實驗步驟
1. 細胞接種
消化細胞,制備單細胞懸液,計數。
接種到96 孔板:
每孔 1000~10000 個細胞 / 100 μL 培養基(依細胞生長速度調整)。
置于培養箱過夜,讓細胞貼壁。
2. 藥物 / 處理因素干預
吸去舊培養基,加入含不同濃度藥物的培養基,每孔 100 μL。
每組設 3~6 個復孔,同時設:
空白孔(只加培養基,無細胞)
對照孔(細胞 + 無藥培養基)
繼續培養:24 h、48 h 或 72 h。
3. 加入 MTT
每孔加入 20 μL MTT 溶液(5 mg/mL),輕輕混勻,繼續培養 4 h。
4. 吸出上清(關鍵)
小心吸掉上清,不要吸走底部甲瓚結晶。
5. 加 DMSO 溶解
每孔加入 150 μL DMSO,搖床低速振蕩 10 min,使結晶完q溶解。
6. 檢測
酶標儀 490 nm 波長測各孔 OD 值
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