DAPI染色液，也稱DAPI dihydrochloride，是一 種可以穿透細胞膜與DNA強有力結合的藍色熒光染料，靈敏度高于EB，可產生比DAPI自身強20多倍熒光。
DAPI染色常用于普通的細胞和組織細胞核染色，也可于熒光顯微鏡或流式細胞儀共同用于細胞凋亡檢測。
DAPI的分子式為C16H15N5•2HCI，分子量為350.25，CAS Number 28718-90-3，DAPI 的the max激發波長為340nm,the max發射波長為488nm，DAPI和雙鏈DNA結合后,the max激發波長為364nm,the max發射波長為460nm。
DAPI 染色流程（熒光切片用）
前提：你已經做好 免疫熒光（IF）切片，一抗二抗都孵完、洗干凈了，只差染核。
1. 試劑
DAPI 染色液（按說明書稀釋，一般 1:1000 用 PBS 稀釋）
PBS（磷酸鹽緩沖液）
2. 步驟
- 洗片用 PBS 浸洗片子 3 次，每次 5 min，洗掉未結合的二抗。
- DAPI 孵育（避光！）
滴加稀釋好的 DAPI 工作液，W全覆蓋組織
室溫、避光 孵育 5–10 min
- 洗掉多余 DAPIPBS 洗 3 次，每次 5 min，洗掉背景熒光。
- 封片滴加抗熒光淬滅封片劑，蓋蓋玻片。
- 保存與觀察
避光保存（4℃ 可放幾天）
立即用熒光顯微鏡觀察
