一、核心原理與優勢
原理:兩種熒光標記抗體 / 染料分別靶向不同抗原 / 分子,流式儀同步檢測兩個熒光通道信號,區分雙陽性、單陽性、雙陰性細胞群體。
優勢:
一次實驗獲得雙維度信息,效率顯著高于單標。
精準區分細胞亞群(如 CD4?/CD8? T 細胞)。
可做共定位、凋亡 / 周期、功能狀態聯合分析。
數據可量化、可重復,適合高通量樣本。
二、常見應用場景
免疫細胞分型
T 細胞:CD3/CD4、CD3/CD8、CD4/CD25(Treg)。
B 細胞:CD19/CD20、CD19/IgM。
髓系細胞:CD11b/CD14、CD11c/MHC-II。
細胞凋亡檢測(經典雙標)
Annexin V-FITC + PI:區分活細胞、早期凋亡、晚期凋亡、壞死細胞。
細胞周期與增殖
PI + EdU/BrdU:區分 G0/G1、S、G2/M 期,測增殖率。
胞內因子 / 信號分子
膜抗原 + 胞內因子(如 CD4+IFN-γ、CD8+TNF-α)。
干細胞 / 腫瘤標志物
干性標記 + 分化標記、腫瘤特異性抗原 + 增殖標記。
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