一、Transwell 非接觸共培養
1. 材料
Transwell 小室(常見 0.4 μm 或 8 μm)
細胞 A:下室細胞(比如內皮細胞、腫瘤細胞)
細胞 B:上室細胞(比如巨噬細胞、干細胞、成纖維細胞)
完q培養基
2. 實驗步驟
- 種下室細胞下室(24 孔板)接種細胞 A:每孔 3×10?~1×10? 個,培養基 500 μL,培養過夜貼壁。
- 種上室細胞Transwell 小室中接種細胞 B:每室 2×10?~8×10? 個,培養基 200 μL,培養貼壁。
- 開始共培養把種好細胞 B 的小室放入下室,組成:
上室:細胞 B
下室:細胞 A
放入培養箱共培養 24/48/72 h。
結束實驗
取出小室,分別收集:
下室細胞:測 RNA、蛋白、熒光、功能實驗
上室細胞:測遷移、侵襲、凋亡等
二、直接接觸共培養(細胞混養)
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