細胞劃痕實驗(Wound Healing)
用途:檢測細胞遷移能力
一、材料
貼壁細胞
6 孔 / 12 孔板
無血清培養基
PBS
10 μL 無菌槍頭
倒置顯微鏡
二、實驗步驟
1. 鋪細胞
將細胞種在孔板里,培養至鋪滿單層(100% 匯合)。
2. 血清饑餓(必做)
棄培養基,PBS 洗 1 遍。加無血清培養基,饑餓 12~24 h,抑制增殖,只看遷移。
3. 劃痕
用10 μL 槍頭,在孔中央垂直、勻速劃一條直線。每孔力度、速度盡量一樣。
4. 洗掉漂浮細胞
棄培養基,PBS 洗 2~3 遍,把掉下來的細胞全部洗掉,劃痕變清晰。
5. 培養并拍照
加入無血清培養基。在 0 h、24 h、48 h 同一位置、同一倍數拍照。
三、計算(直接用)
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